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DMSO(细胞冻存)是经典的细胞冻存液的成分之一，用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存，该溶液经无菌处理。

细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成，减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤，从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获得1:10～1:20的稀释，稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜，这是因为当低温保护剂稀释10～20倍以后，该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。

• 减少基因漂移；
  
• 减缓细胞系的衰老；
  
• 稳定表型；
  
• 减少微生物污染及交叉污染机会等。

• 细胞计数器
  
• 细胞冻存管
  
• 超低温冰箱或液氮
  
• 超净工作台

• 注意在超净工作台内无菌操作，尽量避免污染。
  
• 初次使用融化后可在4℃保存1个月，但应减少反复冻融的次数，以免失效。
  
• 杂交瘤细胞冻存时应定期复苏，检查细胞的活性和分泌抗体的稳定性。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 培养细胞至对数生长晚期，显微镜观察其外观、形态、有无污染等，取状态良好的细胞进行冻存操作。如为贴壁生长细胞，用胰蛋白酶消化并用完全培养基终止消化，进行细胞计数；如为悬浮生长细胞，进行细胞计数。
  
• 500～1000g离心5min，弃上清。
  
• 一般按培养基：DMSO(细胞冻存)=9:1或者血清：培养基：DMSO(细胞冻存)=1:8:1等比例配制细胞冻存液。重悬细胞，使细胞浓度达到1～10×10⁶/ml，置于冻存管中，密
  闭、不要拧的太紧，避免弯曲变形。
  
• 一般遵循1℃/min的速率进行冷冻。亦可采用4℃ 20min，-20℃ 30min，-70℃过夜，最后置于液氮罐中长期存储。